镉诱导大鲵肝脏与肠金属硫蛋白的分离纯化与鉴定

北京大学学报（自然科学版）

镉诱导大鲵肝脏与肠金属硫蛋白的分离纯化与鉴定

李令媛,马宏宝,安钰,茹炳根

北京大学生命科学学院，北京，100871

收稿日期:1996-02-05 出版日期:1996-07-20 发布日期:1996-07-20

Isolation and Purification of Metallothionein from Liver and Intestine of Giant Salamander Induced by Cadmium

LI Lingyuan, MA Hongbao, AN Yu, RU Binggen

College of Life Sciences, Peking University, Beijing, 100871

Received:1996-02-05 Online:1996-07-20 Published:1996-07-20

摘要/Abstract

摘要： 以两栖动物大鲵为材料，镉诱导金属硫蛋白(MT)合成，凝胶过滤Sephadex G-50及弱阴离子交换 DEAE Sepharose Fast Flow常压液相柱层析进行两次分离纯化肝脏及肠材料，分别得到两个MT亚型，凝胶过滤表观分子量约12kD，半胱氨酸含量约21%～24%，主要含Cd与Zn,Cd/Zn约为3/1，肝MT产率为628μg MT/g鲜重肝，肠 MT产率为185μgMT/g鲜重肠，250nm附近均具有紫外吸收肩。

关键词: 金属硫蛋白, 大鲵, 分离纯化, 分析鉴定

Abstract: The giant salamander is very interesting animal from evolutionary point of view,because its transitional position from aquatic to terrestrial life, therefore, the present investigation dealing with the metallothionein (MT) molecular evolution of the giant salamander provides significant clues to evolution of vertebrate. Each extract of liver and intestine of giant salamander induced by subcutaneous injection of cadmium (CdCl₂) was separated by gel filtration chromatography Sephadex G-50 column,then was separated into twoisometallothioneins (isoMTs) by ion-exchange chromatography DEAE Sepharose Fast Flow column. According to the results of gel filtration HPLC detection, the molecular weight of the two isoMTs was about 12000 dalton. The isoMTs contained Cd and Zn (cadmium and zinc) and the value of Cd/Zn was about 3/1. The Cys content was about 21%～24% and the product amount were about 628μg·MT/g·wet liver, 185μg·MT/g·wet intestine. The isoMTs have the typical amino acid composition of metallothionein and U.V. absorption shoulder near 250 nm.

Key words: metallothionein, giant salamander, isolation and purification

中图分类号:

Q512.2

李令媛,马宏宝,安钰,茹炳根 . 镉诱导大鲵肝脏与肠金属硫蛋白的分离纯化与鉴定[J]. 北京大学学报（自然科学版）.

LI Lingyuan,MA Hongbao,AN Yu,RU Binggen. Isolation and Purification of Metallothionein from Liver and Intestine of Giant Salamander Induced by Cadmium[J]. Acta Scientiarum Naturalium Universitatis Pekinensis.

导出引用管理器 EndNote|Ris|BibTeX

链接本文: https://xbna.pku.edu.cn/CN/

https://xbna.pku.edu.cn/CN/Y1996/V32/I4/534

[1]	康巧华,陈巧林,刘峰,任宏伟,茹炳根. 酵母双杂交系统检测金属硫蛋白(MT)间的相互作用[J]. 北京大学学报（自然科学版）, 2002, 38(2): 197-203.
[2]	林芃,任宏伟,茹炳根. 鱼体内金属硫蛋白与水环境关系的研究[J]. 北京大学学报（自然科学版）, 2001, 37(6): 779-784.
[3]	王寒松,俞梅敏,茹炳根. 人金属硫蛋白-3的α结构域的表达及其性质研究[J]. 北京大学学报（自然科学版）, 2001, 37(4): 470-476.
[4]	季清洲, 王立波, 周元, 茹炳根. 金属硫蛋白结合铅离子的竞争反应和置换反应研究[J]. 北京大学学报（自然科学版）, 2000, 36(4): 503-508.
[5]	安钰,李根培,茹炳根. 兔肝金属硫蛋白-Ⅱ的晶体培养及初步衍射研究[J]. 北京大学学报（自然科学版）, 2000, 36(2): 268-270.
[6]	郑军恒,李海洋,茹刚,茹炳根. 金属硫蛋白清除羟自由基功能的研究[J]. 北京大学学报（自然科学版）, 1999, 35(4): 573-576.
[7]	郑军恒；茹刚；茹炳根. 人胎肝金属硫蛋白的分离纯化及酶联免疫吸附检测[J]. 北京大学学报（自然科学版）, 1999, 35(2): 225-229.
[8]	唐建国, 茹炳根, 徐长法, 胡美浩, 朱圣庚. 蛋白质工程的研究[J]. 北京大学学报（自然科学版）, 1998, 34(2): 342-349.
[9]	唐建国, 茹炳根, 徐长法, 胡美浩, 朱圣庚. 蛋白质工程的研究[J]. 北京大学学报（自然科学版）, 1998, 34(2): 342-349.
[10]	淮清,方兴旺,王文清. 哺乳动物CuMT和(Cu,Zn)MT与H₂O₂反应动力学的研究[J]. 北京大学学报（自然科学版）, 1997, 33(6): 763-769.
[11]	殷慎敏,李令媛,茹炳根 . 小鼠金属硫蛋白基因-I 在CHO细胞中稳定表达及其在医疗方面的应用[J]. 北京大学学报（自然科学版）, 1996, 32(4): 481-487.
[12]	杨志伟,王文清,盛湘蓉,邝宝,茹炳根. 金属硫蛋白分子改造与设计[J]. 北京大学学报（自然科学版）, 1995, 31(6): 739-744.